SF9(昆蟲卵巢細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)教程

SF9(昆蟲卵巢細(xì)胞)特點(diǎn)：

1.細(xì)胞靜置培養(yǎng)時半貼壁生長，也可以使用搖瓶懸浮培養(yǎng)

靜置培養(yǎng)時細(xì)胞會大量附著瓶底生長，呈半貼壁狀態(tài)，會有少部分細(xì)胞懸浮生長；

搖瓶培養(yǎng)時可以很快適應(yīng)懸浮生長，呈單個或小聚團(tuán)懸浮生長；

2.對溫度極為敏感

細(xì)胞于26-28℃空氣培養(yǎng)，需要盡量控制溫度，保證細(xì)胞生長狀態(tài)；

若溫度低于26℃，細(xì)胞生長速度會變慢，但恢復(fù)溫度后生長速度會逐漸恢復(fù)，不會對細(xì)胞產(chǎn)生過大傷害；

若溫度28℃-30℃，細(xì)胞生長嚴(yán)重受限；若溫度高于30℃，細(xì)胞將受不可逆?zhèn)?dǎo)致無法使用，即使溫度恢復(fù)也無法恢復(fù)正常生長狀態(tài)；

同時注意使用的培養(yǎng)基、PBS及其他試劑應(yīng)復(fù)溫至室溫（最好26-28℃），盡量減少觀察細(xì)胞次數(shù)和時間；

3.細(xì)胞對吹打、氣泡等機(jī)械損傷敏感

細(xì)胞操作時若吹打力度過大、氣泡過多將嚴(yán)重影響細(xì)胞生長狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞后續(xù)存活率降低，注意操作輕柔；

4.細(xì)胞可以適應(yīng)多種培養(yǎng)體系

該細(xì)胞多用于真核細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)，因此針對該細(xì)胞有諸多培養(yǎng)體系，例如Grace's Insect Medium、SF900 II、TNM-FH、ESF921等培養(yǎng)體系，包括含血清的培養(yǎng)體系和不含血清的培養(yǎng)體系，可以根據(jù)自身實驗需要選擇逐步更換為合適的培養(yǎng)體系；

5.細(xì)胞凍存存活率不高

實際實驗過程中，尚恩發(fā)現(xiàn)SF9細(xì)胞疑似表現(xiàn)出較低的凍存保存能力，凍存后活率會隨保存時間增加而逐漸下降，因此若有持續(xù)培養(yǎng)該細(xì)胞或者快速復(fù)蘇進(jìn)行實驗需求的實驗室建議定期復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞并重新凍存以保證細(xì)胞凍存活性不會下降至無法接受的范圍；

6.細(xì)胞貼壁培養(yǎng)后可能會伸出觸角

細(xì)胞在貼壁培養(yǎng)時，一周左右會有部分細(xì)胞伸出較長觸角，同一個培養(yǎng)瓶培養(yǎng)時間越長，有觸角的細(xì)胞可能越多，這是細(xì)胞自然現(xiàn)象，非細(xì)胞交叉污染或狀態(tài)不佳；