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SPL-34396儲樣板,PP,96孔,0.4ml,圓底,非滅菌,透明說明

更新時(shí)間:2023-05-15 點(diǎn)擊次數(shù):770次

細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)板的操作步驟如下:

  1.加樣品:將標(biāo)本稀釋液100ul(或2滴)加到包被板內(nèi)(預(yù)留陰陽性及空白對照2-5孔),將待檢血清用PBS或生理鹽水按1:20稀釋后取10ul加入反應(yīng)孔內(nèi)。

  2.加對照:加入陰性對照1-3孔,陽性對照1孔,各100ul對照血清。空白對照1孔空置。

  3.溫育:將反應(yīng)板震蕩使樣品混勻后,置37℃溫箱或水浴反應(yīng)20分鐘。

  4.洗板:用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。(1)手洗:將反應(yīng)板孔內(nèi)容物傾出,將洗滌液注滿反應(yīng)孔,放置30秒鐘后用力甩去,如此重復(fù)5次后拍干。(2)機(jī)洗:5次,每孔注入洗滌液200ul或注滿,停留30秒鐘后吸盡拍干。

  5.加酶標(biāo)工作液:每孔加入100ul(或2滴)酶標(biāo)工作液,置37℃溫箱反應(yīng)20分鐘后,洗板5次,洗板操作同步驟4。

  6.顯色和終止反應(yīng):將底物A、B液各50ul(或1滴)加到反應(yīng)孔內(nèi),37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul(或1滴)混勻終止反應(yīng)。

  結(jié)果判定

  1.酶標(biāo)儀設(shè)定波長450nm,先用空白調(diào)零,然后測定各孔OD值;如果選用雙波長測定,不必設(shè)置空白對照孔。

  2.當(dāng)陰性對照平均OD值小于0.08,陽性對照(pc)OD值大于0.30時(shí),說明試劑盒有效且實(shí)驗(yàn)操作正確,否則應(yīng)當(dāng)重復(fù)試驗(yàn)。

  3.臨界值(CUT—OFF VALUE)=0.15+陰性對照平均(NC)OD值(當(dāng)陰性平均OD值小于0.05時(shí),按0.05計(jì)算;當(dāng)陰性平均OD值大于或等于等于0.05時(shí)按實(shí)際值計(jì)算)。

  4.標(biāo)本OD值≤臨界值為陰性,標(biāo)本OD值>臨界值為陽性。

  常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量:不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。

貨號貨號品名,參數(shù),規(guī)格,包裝
SPL-92308八道吸液吸頭,非滅菌,散裝, 50個(gè)/箱
SPL-92108八道吸液吸頭,滅菌,單獨(dú)包裝  25個(gè)/箱,1個(gè)/包
SPL-92208八道吸液吸頭,滅菌,單獨(dú)包裝  50個(gè)/箱,1個(gè)/包
SPL-80010白鼠盒  PS  183x97x33mm  1個(gè)/箱
SPL-34396儲樣板,PP,96孔,0.4ml,圓底,非滅菌,透明,10個(gè)/包,10包/箱


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